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骨保护素试剂盒说明书

秒速赛车是真的吗2020-10-09 浏览次数:12

一.产品介绍:

骨保护素()或破骨细胞抑制因子(OCIF)是受体群 11b 的糖蛋白,是有 380 个氨基 酸分子的合成单体, 在细胞内组合为二聚物,主要 以二硫键链接二聚物形式分泌到细胞外腔。骨保护素由包括在内的细胞和不同组织生成。骨保护素是通过 诱饵受体对骨吸收进行负调控, 这样就中和了 RANKL 在破骨细胞生成的作用。骨保护素也参与血管钙化的调控。

 

二.骨保护素试剂盒应用范围:

1.骨质疏松(1,2)

2.局部吸收活性增加的疾病(3-6)

3. 关节炎(7,8)

4.治疗监控(9-11)

5.心血管疾病(12-17) 

 

三.骨保护素试剂盒检测步骤:

所有试剂和样本在实验前要平衡至室温 (18-24℃)。 标记好 STD/SAMPLE/CTRL(标准品/样本/质控品) 的位置。     从铝箔袋中取出所需数量的微孔板条。将不使 用的微孔板条放回带有干燥剂的铝箔袋在 4℃ (2-8℃)保存,可稳定至标签所标日期。 


 1)取 ASY 稀释液(红盖)150µl 加入到每孔内 2)校准品/质控品/样本各取 20µl 分别加入到相应孔 内(复孔操作),并轻轻晃动 3) 每孔内加入50µl 抗体(生物素标记OPG抗体, 绿盖),并轻轻晃动 4)遮盖微孔板室温(18-24℃)下孵育 4 小时 5)用 300µl 稀释洗液反复洗板 5 次,最后一次清洗 后,于吸水纸上强拍微孔板以除去残留的洗液 6)加入结合物(棕盖)200µl 至每孔内 7)遮盖微孔板室温(18-24℃)下孵育 1 小时 8)用 300µl 稀释洗液反复洗板 5 次,最后一次清洗 后,于吸水纸上强拍微孔板以除去残留的洗液 9)加入 TMB 底物(蓝盖)200µl 至每孔内 10)室温(18-24℃)下避光孵育 30 分钟 11)加入终止液(白盖)50µl 至每孔内并轻轻晃动 12)以 450nm 波长(630nm 参考值)立即测定吸 光度 

 

四.骨保护素试剂盒检测原理:

本试剂盒采用夹心 ELISA 检测人血清和血浆中 的骨保护素。添加缓冲液,标准品/样本/ 质控品,将检测的抗体(小鼠抗人生物素标记 OPG 单克隆抗体)移到预包被羊抗 OPG 多克隆抗体微量 滴定条中,标准品/样本/质控品中的 OPG 与微孔中 预包被的抗体结合,与要检测的抗体形成夹心层。 清洗所有非特异性未结合的物质。第二步,结合物
(链霉亲和素-HRPO)加入微孔板中,与检测抗体反 应。再次清洗后,将 TMB 底物加到微孔板中。酶催 化的底物颜色变化与 OPG 数量呈比例。用酶标仪可 以检测到颜色变化。用标准品中获得的值,生成吸 光度(450nm)与标准浓度的剂量反应的曲线。OPG 浓度直接从剂量曲线上获得。 
 
 

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